Integrating hpv testing in cervical cancer screening programs a manual for program managers

Ursu Ramona Gabriela

Popa, Iai Prof. Universitatea de Medicin i Farmacie Gr. Introducere 2. Stadiul actual al cunoaterii 2. Structura papillomavirusurilor 2. Componente virale i proprieti fizice 2. Genomul HPV i ciclul replicrii virale 2. Clasificarea papillomavirusurilor 2. Istoria natural a infeciei HPV 2. Caracteristicile epiteliului cervical 2.

Transmiterea infeciei HPV 2. Progresia leziunilor 2. Mecanisme carcinogenetice 2.

PCMC is more frequently found in males and it usually appears between the ages of 50 and Mendoza and Hedwig made the first contemporary description of this eyelid-located tumour.

Capacitatea transformant a HPV 2. Interaciunea HPV cu factorii de mediu 2. Metode de diagnostic ale cancerului cervical i a leziunilor precanceroase 2.

Ursu Ramona Gabriela

Metode de inspecie vizual 2. Metode citologice i histologice 2. Metode de biologie molecular 2. Alternative terapeutice ale leziunilor precanceroase i ale cancerului cervical 2. Prevalena, incidena, persistena i clearance-ul infeciei HPV 2.

Mult mai mult decât documente.

Obiectivele studiului 4. Epidemiologia infeciei cu HPV 5. Optimizarea metodei de detecie a 37 genotipuri HPV 6. Prevalena i distribuia genotipurilor HPV n rndul femeilor din zona Moldovei 9. Corelaii ale ncrcturii virale a HPV 16 i HPV 18 cu gradul displaziei cervicale i cu factorii de risc ai neoplaziei cervicale Infecii asimptomatice cu transmitere sexual Concluzii generale Originalitatea contribuiilor proprii Perspectivele pe care le deschide teza Bibliografie 1.

cancer bucal es curable

Introducere Cei mai frecveni ageni etiologici ai infeciilor cu transmitere sexual ITS sunt Neisseria gonorrhoeae, Treponema pallidum, Haemoplilus ducreyi, Chlamydia trachomatis, virusul herpes simplex 2, virusul papilloma uman, Trichomonas vaginalis.

Este binecunoscut faptul c cele mai multe ITS sunt simptomatice, dar nu se cunoate frecvena i importana infeciilor asimptomatice n transmiterea ITS.

Pe baza prezenei simptomelor, indivizii pot fi divizai n mai multe categorii: indivizi simptomatici simptomele sunt prezente ; indivizi cu infecie inaparent individul prezint simptome dar nu sunt recunoscute ca fiind produse de o ITS ; persoane asimptomatice- aceasta categorie este important, deoarece numai pacienii simptomatici vor solicita tratament specific. Dintre infecile produse de ageni etiologici amintii, numai n cazul ancrului moale, majoritatea indivizilor sunt simptomatici, cu un numr considerabil de infecii inaparente.

Studiile de istorie natural care analizeaz infeciile cu HPV, Neisseria gonorrhoeae i Chlamydia trachomatis indic faptul c aceti indivizi r mn n mod caracteristic asimptomatici, pe cnd indivizii cu herpes genital prezint n mod tipic infecie inaparent i nu asimptomatic. Dintre toi aceti ageni care produc infecii genitale, studiul din cadrul tezei de doctorat a analizat doar infeciile produse de HPV. Pe de alt parte, majoritatea femeilor din rile n curs de dezvoltare nu au acces la programele de profilaxie a cancerului de col uterin, ceea ce explic diagnosticarea acestei forme de cancer n stadii care depesc prin severitate, capacitile terapeutice actuale 3.

Romnia, cu o populaie de 9.

causes of hpv throat cancer paraziti intestinali viermi

Estimrile actuale indic faptul c n fiecare an aproximativ de femei sunt diagnosticate cu cancer de col uterin i aproape mor din cauza bolii. Dei dup formularea relaiei de cauzalitate dintre HPV i cancerul de col uterin, n majoritatea rilor au fost iniiate studii extinse n vederea cunoaterii prevalenei i distribuiei infeciei cu HPV Human Papilloma Virusn Romnia, studii similare au fost ntreprinse sporadic, pe loturi nesemnificative, iar datele rezultate nu au fost sistematic raportate, motiv pentru care, despre Romnia se afirm c nu sunt date disponibile despre aceti indicatori Raport OMS, Harald zur Hausen a formulat, nipoteza c HPV joac un rol important n etiologia cancerului de col uterin, identificnd mpreun cu echipa sa, n perioadagenotipurile HPV 16 i HPV 18 n tumori ale cervixului; descoperirea a fost rspltit cu Premiul Nobel pentru Medicin i Fiziologie 6.

Rolul HPV n oncogenez este demonstrat cu certitudine nu numai pentru cancerul de col uterin ci i n etiologia altor tipuri de cancere anogenitale anus, vulv, vagin, penis sau cancere ale capului i gtului.

papilloma virus intervento ambulatoriale

Spre deosebire de alte neoplazii, cancerul de col uterin poate fi prevenit prin programe de screening concepute pentru a identifica i trata leziunile precanceroase. Terapia leziunilor precanceroase poate fi chirurgical, prin tehnici distructive e.

Perspectiva studiilor epidemiologice privind incidena i prevalena infeciilor cu HPV se va rsfrnge n trecerea de la profilaxia de tip secundar screeningla profilaxia primar prin vaccinaren paralel cu eficientizarea programelor de promovare a sntii 9. Organizaia Mondial a Sntii OMS recunoate importana cancerului de col uterin ca problem global de sntate public i recomand vaccinarea HPV, ca vaccinare de rutin Obiectivele studiului Lipsa datelor ntr-o ar aflat pe primul loc n Europa n ceea ce privete incidenta si mortalitatea prin cancer cervical, necesitatea acumulrii de date tiinifice utile decidenilor politici pentru stabilirea strategiei de prevenire i control a BTS boli cu transmitere sexualinclusiv infeciile HPV, au condus la stabilirea urmtoarelor obiective tiinifice ale acestei teze de doctorat: 1.

Epidemiologia infeciei cu HPV La nceputul anilor 90 studii epidemiologice bazate pe tehnici de biologie molecular i cercetri privind istoria natural a infeciei cu Human Papilloma Virus HPV localizat la nivelul tractului genital, au adus dovezi suficient de puternice pentru a atribui un rol cauzal determinant al HPV n inducerea cancerului cervical.

Aceast asociere a fost evaluat integrating hpv testing in cervical cancer screening programs a manual for program managers baza criteriilor de cauzalitate elaborate de experi din colectivitai de cercetare, de la institute internaionale de renume.

Modelul propus de aceast relaie de cauzalitate este valabil la nivel mondial i nu exist alte dovezi alternative care s explice etiologia cancerului cervical.

HPV a fost astfel propus drept cauz necesar a cancerului cervical. De asemenea, aceast descoperire a dus la iniierea programelor de prevenie primar a infeciei determinate de HPV, prin descoperirea formulei vaccinale. Dovada etiologic a implicrii HPV n producerea cancerului cervical a fost demonstrat de studii populaionale n ntreaga lume. Fac excepie doar forme rare de limfoame cervicale, sarcoame i alte tipuri histologice rare.

Studiile comparative au presupus testarea femeilor care aveau caracteristici similare cu cele ale pacientele din lotul de studiu: vrst, status educaional, expunerea la factori de risc adiionali.

И куда же мы. -- спросил Хилвар, когда они снова оказались в Прежде чем ответить, Олвин довольно долго в задумчивости смотрел на -- Ты что -- считаешь, что надо возвращаться.

Pacientele HPV pozitive pentru 16 sau 18 se consider a avea un risc mult mai crescut dect pacientele infectate cu alte serotipuri. Din acest motiv, serotipurile 16 i 18 fac parte din categoria HR Hpv tca treatment, mpreun cu genotipurile 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, Numitorul comun pentru rile n curs de dezvoltare este reprezentat de status-ul socieoeconomic sczut i de lipsa programelor de screening indispensabile n detectarea precoce a leziunilor canceroase i precanceroase.

Pe de alt parte, cancerul cervical afecteaz femei relativ tinere, ceea ce duce automat la scderea speranei de via. O estimare recent concluzioneaz c neoplazia cervical este cea mai important cauz de pierdere de ani de viata pentru rile n curs de dezvoltare. Estim rile GLOBOCAN sunt publicate pentru anul 42pe sexe i pe grupe de vrstbazndu-se pe datele recente furnizate de IARC; la acestea se adaug informa iile oficiale disponibile pe site-urile institu iilor de s n tate public i datele provenite din surse locale.

Dificultile n interpretarea acestor date sunt explicate m car n parte de faptul c sursele de date sunt n continu cretere i ele nu pot fi sistematizate i comparate deoarece nregistrarea acestora nu se face dup o metodologie unitar i deci, exist inegaliti n ceea ce privete colectarea de date att calitativ ct i cantitativ.

Aceste precizri privind calitatea datelor nregistrate inciden, mortalitate, morbiditate sunt utile atunci cnd tentm s comparm valori ale diferitelor forme de cancer nregistrate, n diferite ri de pe glob.

De multe ori, diferenele observate pot fi rezultatul utilizrii unei metodologii diferite, sau care se modific n timp, pentru aceeai ar, ceea ce poate 9 duce la valori total diferite ale incidenei pentru aceeai ar.

integrating hpv testing in cervical cancer screening programs a manual for program managers

Pe baza acestor date putem observa incidena extrem de sczut a cazurilor de cancer de col uterin n rile din Europa de vest i n rile Nordice, n America de Nord i Australia. La pol opus se remarc valorile ngrijortoare hpv impfung manner wo n rile din Africa, America de Sud 50 Lipsa programelor eficiente de screening precum i gradul sczut de informare al populaiei feminine cu risc, sunt probabil principalele cauze ce au dus la creterea incidenei cancerului de col uterin n aceste zone ale globului.

Date recente iunie situeaz Romnia pe primul loc n Europa n ceea ce privete incidena Lipsa acestor date pentru Neuroendocrine cancer means poate fi explicat, macar n parte, prin dificultatea centralizrii unor date dup o metodologie unic i prin absena unui soft-ware dedicat, pentru nregistrarea corect, complet i unitar a datelor privind cancerele nregistrate la nivel regional, respectiv naional.

O a doua explicaie este lipsa fondurilor necesare testrii prin tehnici de biologie molecular, n vederea stabilirii prevalenei i distribuiei genotipurilor HPV n rndul populaiei feminine. Al doilea obiectiv este acela de a stabili rolul ncrcturii virale ca biomarker n diagnosticarea leziunilor displazice, obiectiv care presupune selectarea pacientelor HPV 16 i HPV 18 pozitive, monitorizarea ncrcturii virale, astfel nct s putem stabili acea valoare prag a ncrcturii virale util diagnosticului precoce, n vederea instituirii msurilor terapeutice n timp util.

Toate acestea reprezint o provocare pentru noile modaliti de testare, pentru c implementarea de noi metode de screening naional presupune i consideraii politice.

O asemenea problem s-a pus n Anglia, integrating hpv testing in cervical cancer screening programs a manual for program managers anume, un proiect multicentric randomizat i-a propus s evalueze dac testarea HPV poate reduce incidena cancerului cervical ntr-o manier cost eficient.

Prin asemenea tipuri de proiecte se poate demonstra c utiliznd o singur rund de testare HPV se poate cheltui mai puin dect realiznd 2 runde de citologie n mediu lichid.

Un asemenea proiect poate fi indeplinit n ri unde exist un program de screning al cancerului cervical foarte bine organizat i sistematizat. Implementarea presupune de asemenea ca femeile testate s primeasc mai multe informaii despre testarea ce urmeaz a li se realiza, precum i o infrastructur adecvat pentru urmrirea pe termen ndelungat programe de screening organizate i iniiative ale guvernelor de a participa la aceste aciuni Una din cele mai importante descoperiri medicale n ultimii 50 de ani a fost indentificarea HPV drept cauz primar a cancerului cervical.

De asemenea, aceaai informaie a condus la dezvoltarea de teste screening care identific virusul direct n celulele cervicale, n opoziie cu abordarea convenional de a observa anomaliile citologice cauzate de virus. Specialiti n domeniu au revizuit o multitudine de teste care au evideniat c testarea HPV este mult mai sensibil dect citologia i poate fi, n mod sigur realizat la intervale mai mari de timp.

  • Ursu Ramona Gabriela
  • Oncolog-Hematolog Nr. 35 (2/) by Versa Media - Issuu

Studii viitoare vor propune un nou algoritm pentru utilizarea testrii HPV ca unic test de screening pentru femeile cu vrsta peste 30 de ani Recoltarea produselor patologice de la nivelul colului uterin se realizeaz cu ajutorul periuelor Cervex Brush care se descarc n recipientele pentru transportul probei ThinPrep PreservCyt Solution. Dup descrcarea periuei n soluia ThinPrep, aceasta se arunc. Amplificarea intelor: Amplificarea intelor ADN HPV este realizat cu ajutorul polimerazei AmpliTaq Gold care faciliteaz amplificarea hot start, precum i cu ajutorul beta integrating hpv testing in cervical cancer screening programs a manual for program managers ca i control.

Iniial, mixul reaciei Integrating hpv testing in cervical cancer screening programs a manual for program managers este nclzit pentru a activa polimeraza AmpliTaq Gold, ceea ce favorizeaz denaturarea ADN-ului viral i a celui genomic, precum i punerea n contact cu secvenele primerilor int. Pe masur ce amestecul se rcete, primerii upstream i downstream se fixeaz pe inta ADN. Acest process este repetat pentru un anumit numr de cicluri 40n fiecare ciclu avnd loc integrating hpv testing in cervical cancer screening programs a manual for program managers cantitii de amplicon.

Amplificarea are loc numai n regiunea genomului HPV sau a beta globinei, ntre cele mai apropiate perechi de primeri; nu are loc amplificarea ntregului genom. Amplificarea selectiv: Amplificarea selectiv a intelor de acid nucleic este obinut prin utilizarea enzimei AmpErase uracil-N-glicozilaza i a deoxiuridin trifosfat.

Deoxiuridina nu este prezent n ADN-ul natural, dar este prezent ntotdeauna n ampliconi, datorit faptului c Mastermix-ul conine deoxiuridin trifosfat; prin urmare, numai ampliconii conin deoxiuridin.

Enzima AmpErase, care este inclus n Mastermix, catalizeaz desfacerea deoxiuridenei care conine ADN, n reziduuri de deoxiuridin, prin deschiderea lanului de deoxiriboz la nivelul C1. Enzima 14 AmpErasa este inactiv la temperaturi peste 55 C, i, prin urmare nu va distruge ampliconii int. Dup amplificare, orice rest enzimatic este denaturat prin adaugarea soluiei de denaturare, ceea ce previne degradarea ampliconilor.

Ampliconii denaturai sunt trasferai n godeurile corespunzatoare din tavia de hibridizare, godeuri care conin lichidul de hibridizare i un singur strip din kit strip care conine probe de HPV i beta globin. Ampliconii fixai de biotin vor hibridiza acele probe oligonucleotidice care conin secvena corespunztoare probei complementare.

Ampliconul care conine secvene apropiate 1 pn la 3 neconcordanecomplementare probei, vor hibridiza cu aceast band. Reacia de detecie: Dup reacia de hibridizare, stripurile sunt splate pentru a ndeprta materialul nefixat.

integrating hpv testing in cervical cancer screening programs a manual for program managers helmintox bez receptes

Se adaug n tvia de hibridizare un conjugat: peroxidaza de hrean streptavidina. Aceasta se va fixa pe ampliconii hibridizai cu oligonucleotidele de pe strip.

Încărcat de

Stripul este supus integrating hpv testing in cervical cancer screening programs a manual for program managers etape de splare pentru a ndeparta excesul de streptavidina. Se adaug un substrat soluie care conine peroxid de hidrogen i 3, 3, 5, 5 tetrametilbenzidin TMB.

Validarea n cazul testului hpv warzen am fu? genotipare a fost posibil prin ndeplinirea criteriilor de calitate pentru martorul pozitiv i negativ, cat i prin prezena benzilor de beta globin cu cele dou valori, high, respectiv low. Principiul RTPCR: intensitatea fluorescenei din sistemul de reaie este direct proporional cu cantitatea iniial a produsului de amplificat; vizualizarea este posibil prin utilizarea unei molecule fluorescente Comparaie PCR versus RT PCR : o fluorescena este msurat n timpul fiecrui ciclu de amplificare semnalul este direct propoional cu cantitatea produsului PCR ; o curbele de amplificare cresc dup un numr de cicluri care este proporional cu cantitatea iniial de matri template ADN; o raportarea la valorile curbei standard va oferi date legate de cuantificarea produsului dorit Aceasta permite cuantificarea intei nainte de acumularea inhibitorilor, inactivarea polimerazei.

Evaluarea integrating hpv testing in cervical cancer screening programs a manual for program managers qPCR Odat ce experimentul a fost finalizat, se realizeaz analiza datelor obinute.

Baseline este ciclul iniial n RTPCR cnd se poate observa o mic schimbare n semnalul fluorescent, de obicei regsindu-se la ciclurile Cuantificarea absolut: presupune construirea unei curbe standard pentru fiecare int; curba standard este realizat dintr-o serie de diluii ale unei probe cu o concentraie cunosct; Ct-ul fiecrui standard se situeaz pe axa orizontaliar pe axa vertical sunt notate valorile logaritmice ale concentraiilor cunoscute; curba standard este utilizat pentru a estima concentraia probelor necunoscute.

Recoltarea produselor patologice i purificarea ADN HPV se realizeaz similar testului de genotipare, anterior detaliat. Singura deosebire este faptul c protocolul nu presupune concentrarea probei prin centrifugare, tehnica Real Time PCR fiind mult mai sensibil dect PCR ul clasic. Pacienta H.

metastatic cancer meaning in telugu viermi a visa

Parametrii generai de soft-ul instrumentului pe baza celor 5 standarde s-a ncadrat in limitele normale fig.

Asevedeași